Что такое облигатно анаэробные микроорганизмы у женщин. Каменные орудия и техника их изготовления. I. Облигатно-анаэробные бактериимикрофлоры влагалища (резидентная микрофлора) включают все микроорганизмы. Как расшифровать результаты мазка: выявленные заб

Что такое Фемофлор?

Дисбаланс микробиоты урогенитального тракта женщин, обусловленный условно-патогенными микроорганизмами, характеризуется изменением качественного и/или количественного состава нормобиоты, метаболическими и иммунными нарушениями, в ряде случаев клиническими проявлениями. Частным проявлением выраженного дисбаланса биоты является бактериальный вагиноз.

Полное выявление этиологической структуры заболевания позволит своевременно установить диагноз, выявить осложненные формы течения заболевания и, соответственно, провести направленную адекватную терапию, в том числе на ранней стадии, до развития осложнений.

В основу метода положена комплексная количественная оценка биоты методом ПЦР в «реальном времени» (РВ). Проводят сравнение количества конкретных представителей нормо - и условно-патогенной биоты с общим количеством микроорганизмов с целью выявления дисбаланса биоты, степени его выраженности и определения этиологической роли конкретных микроорганизмов в его развитии при условии контроля качества получения клинического образца для исследования.

Способ позволяет в короткие сроки объективно оценить:

• Качественный и количественный состав биоты;
• Дифференцировать состояния физиологического равновесия и дисбаланса;
• Контролировать качество взятия биопробы.

Показатели, анализируемые с помощью набора Фемофлор 16:

• Контроль взятия материала
• Общая бактериальная масса
• Lactobacillus spp.
• Enterobacteriaceae
• Streptococcus spp.
• Eubacterium spp.
• Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp.
• Staphylococcus spp.
• Sneathia spp./Leptotrihia spp./Fusobacterium spp.
• Megasphaera spp./Veilonella spp./Dialister spp.
• Lachnobacterium spp./ Clostridium spp.
• Mobiluncus spp./Corynebacterium spp.
• Peptostreptococcus spp.
• Atopobium vaginae
• Ureaplasma (urealyticum + parvum)
• Mycoplasma (hominis +genitalium)
• Candida spp.

Контроль взятия материала (КВМ).

Необходимым условием количественного анализа урогенитальной биоты является правильная техника взятия соскоба с поверхности соответствующего биотопа (уретра, цервикальный канал, влагалище). Показателем правильного взятия биоматериала является достаточное количество геномной ДНК человека в пробе. Источником этой ДНК являются эпителиальные клетки, попадающие в пробу при правильной технике взятия биоматериала. Оптимальная величина этого показателя должна составлять не менее 105.

Показатель оценивается в абсолютных значениях.

Общая бактериальная масса (ОБМ).

Показатель, по которому можно судить об общем количестве бактерий. Оценивается в абсолютных значениях. Обычно эта величина составляет 106 - 108. Величина ОБМ большая, чем 108, свидетельствует об избыточном микробном обсеменении биоматериала. Чем больше величина ОБМ, тем больше величина микробной массы в образце. Величина показателя ОБМ меньшая, чем 105 соответствует сниженному количеству микроорганизмов в образце, что может быть следствием атрофических процессов или антибиотикотерапии.

Оценка нормобиоты.

Главным представителем нормофлоры урогенитального тракта у женщин репродуктивного возраста являются представители рода Lactobacillus (ЛБ).

Оценка нормобиоты производится как в абсолютных значениях, так и относительно общей бактериальной массы. В норме абсолютное количество лактобацилл практически не отличается от общего количества бактерий, то есть составляет 106-108

Относительное количество лактобацилл - разница между Lg10 общей бактериальной массы (ОБМ) и Lg10 лактобацилл (ЛБ). Например, если общее количество бактерий составляет 107, Lg10 этого количества будет равен 7. В норме разница логарифмов (порядков) ОБМ и ЛБ не должна превышать 0,5, что определяется погрешностью метода.

Умеренно сниженный уровень лактобацилл - при разнице логарифмов (порядков) от 0,5 до 1.

Значительно сниженный уровень лактобацилл-при разнице логарифмов (порядков) больше чем 1.

Чем меньшую долю в ОБМ составляют лактобациллы, тем сильнее угнетена нормальная флора.

Оценка аэробной и анаэробной условно-патогенной микрофлоры.

Количественный уровень аэробной и анаэробной условно-патогенной микрофлоры можно оценить как в абсолютных, так и относительных значениях. Абсолютные количества соответствуют показателям при бактериологичесих исследованиях. Например, количество микроорганизма Gardnerella vaginalis составляет 103.

Относительное количество того или иного микроорганизма вычисляется по отношению к количеству Lactobacillus spp., по разнице между Lg10 лактобацилл и Lg10 конкретного микроорганизма аналогично тому, как вычисляется относительное количество самих лактобацилл по отношению к общему количеству бактерий (ОБМ).

В урогенитальном тракте женщин репродуктивного возраста как аэробные, так и анаэробные условно-патогенные микроорганизмы могут быть причиной патологических процессов в урогенитальном тракте.

Оценка микоплазм, уреаплазм и грибов рода Candida.

Количественную оценку уровня микоуреаплазм (Mycoplasma и Ureaplasma), а также дрожжеподобных грибов рода Candida, проводят только по абсолютному количеству. Клинически значимый уровень Mycoplasma и Ureaplasma составляет 104, дрожжеподобных грибов рода Candida spp - 103.

Показания к назначению анализа

• Наличие инфекционно-воспалительного процесса урогенитального тракта у женщин, вызванного изменением количественного и качественного состава условно-патогенной биоты;
• Профилактическое обследование на урогенитальные инфекции женщин, ассоциированные с условно-патогенной биотой

Материал для исследования

Для исследования используют соскобы эпителиальных клеток

• из влагалища (заднебоковые своды);
• уретры;
• цервикального канала

Критерии количественной оценки биоты

Абсолютный показатель является ориентировочным, зависит от техники взятия биоматериала и способа выделения ДНК.

Относительный показатель - более точный, чем абсолютный - разница десятичных логарифмов (порядков) между общей бактериальной массой (ОБМ) и лактобациллами (ЛБ), а также между лактобациллами (ЛБ) и условно-патогенными микроорганизмами (УПМ).

Нормоценоз

Состояние нормоценоза характеризуется следующими показателями:

• Нормофлора (Lactobacillus spp) имеет нормальный уровень.
• Микоплазмы: Mycoplasma hominis и Ureaplasma (Urealiticum + Parvum) отсутствуют или могут присутствовать в количествах, не имеющих диагностического значения
• Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора отсутствует, имеет нормальный уровень, единичные представители УПМ могут иметь слабо увеличенный уровень.
• Грибы рода Candida отсутствует или может обнаруживаться в количестве, не имеющем диагностического значения.

Умеренный дисбиоз

• Состояние умеренного дисбиоза характеризуется следующими показателями:
• Общая бакмасса имеет нормальный уровень
• Нормофлора (Lactobacillus spp) имеет нормальный или умеренно сниженный уровень.
• Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора: часть условно-патогенной биоты имеет слабо и умеренно повышенный уровень.

Выраженный дисбиоз.

Состояние выраженного дисбиоза характеризуется следующими показателями:

• Общая бактериальная масса может иметь нормальный, повышенный или пониженный уровень.
• Нормофлора (Lactobacillus spp) может отсутствовать, иметь нормальный, умеренно или значительно сниженный уровень.
• Микоплазмы: Mycoplasma hominis и Ureaplasma (Urealiticum + Parvum) могут присутствовать в диагностически значимых количествах.
• Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора: большая часть представителей условно-патогенной микрофлоры имеют умеренно или значительно увеличенный уровень.
• Грибы рода Candida могут присутствовать в диагностически значимых количествах.

Этиологическая структура выявленного дисбаланса:

Анаэробный, если дисбаланс вызван анаэробными микроорганизмами: Gardnerella vaginalis /Prevotella bivia/Porphyromonas spp; Atopobium vaginae; Eubacterium spp; Sneathia spp /Leptotrihia spp/Fusobacterium spp; Megasphera spp/Veilonella spp/Dialister spp; Lachnobacterium spp/Clostridium spp; Mobiluncus spp/Corynebacterium spp; Peptostreptococcus spp

Аэробный, если дисбаланс, вызван аэробной микрофлорой: Enterobacteraceae, Streptococcus spp и Staphylococcus spp

Смешанный если дисбаланс, вызван любым сочетанием аэробной, анаэробной флоры и грибами рода Candida.

Инфекционный процесс, вызванный грибами рода Candida, может протекать без дисбиотических нарушений со стороны условно-патогенной флоры, а также может сочетаться с дисбиозом.

Женщинам накануне необходимо воздержаться от туалета половых органов и спринцевания. Проводить исследование через 48 часов после кольпоскопии, через 24 часа после УЗ-исследования с помощью влагалищного датчика, через 2 недели после применения пробиотиков, эубиотиков, через 4 недели после применения антибиотиков, через 10 дней после применения местных антисептических средств. Не рекомендуется сдавать во время менструального цикла.

Мазок на флору у женщин - лабораторное исследование, определяющее виды бактерий, которые присутствуют во влагалище. Это самый распространенный и простой метод выявления воспалений и ЗППП (заболеваний, передающихся половым путем).

Исследование абсолютно безболезненное. Оно производится во время обычного гинекологического осмотра. Врач берет материал одноразовым шпателем со стенок влагалища и шейки матки. Содержимое влагалища (влагалищный секрет) наносится на стекло. В лаборатории материал окрашивают, для того, чтобы бактерии стали четко различимы.

Цель исследования

• определить состояние микрофлоры влагалища;
• выявить половые инфекции и их возбудителя;
• определить степень воспалительного процесса;
• оценить степень чистоты влагалища, что обязательно перед дальнейшими диагностическими исследованиями и гинекологическими операциями - прижиганием эрозий, удалением полипов, выскабливанием;
• оценить состояние здоровья беременных женщин.

Когда гинеколог берет мазок на флору?

• жалобы на зуд или выделения из влагалища, другие симптомы воспаления;
• профилактические осмотры;
• контроль проведенного лечения;
• прием гормональных препаратов и иммуносупрессоров;
• контроль микрофлоры на фоне длительного приема антибиотиков;
• беременность. Проводится 3 раза за беременность (при постановке на учет, на 30-ой и 36-ой неделе).

Данное исследование имеет множество названий: мазок на флору, общий мазок, бактериоскопия, мазок на чистоту. Существуют также мазки на флору из мочеиспускательного канала и канала шейки матки. Обычно эти три вида мазка проводят совместно.

Нормальная микрофлора влагалища

Влагалище здоровой женщины не стерильно. В нем присутствует множество видов микроорганизмов, их совокупность и называется микрофлорой. Бактерии постоянно конкурируют между собой за места обитания на стенках влагалища и за продукты питания.

Наиболее многочисленными являются лактобактерии и бифидобактерии, которые прикрепляются к эпителию влагалища. Они вырабатывают спирты, перекись, молочную и другие кислоты, обеспечивающие кислую реакцию влагалищного секрета. А также лизоцим и другие ферменты, сдерживающие размножение других видов бактерий.

Микроорганизмы, входящие в состав микрофлоры здоровой женщины

Микроорганизмы	Количество КОЕ/мл
Лактобактерии или палочки Додерлейна Lactobacillus spp	10 7 -10 9
Бифидобактерии Bifidobacterium spp.	10 3 -10 7
Клостридии Clostridium spp.	До 10 4
Пропионибактерии Propionibacterium spp.	До 10 4
Мобилункус Mobiluncus spp.	До 10 4
Пептострептококки Peptostreptococcus spp	10 3 -10 4
Коринебактерии Corynebacterium spp.	10 4 -10 5
Стафилококки Staphylococcus spp.	10 3 -10 4
Стрептококки Streptococcus spp.	10 4 -10 5
Энтеробактерии Enterobacteriaceae	10 3 -10 4
Бактероиды Bacteroides spp.	10 3 -10 4
Превотеллы Prevotella spp.	До 10 4
Порфиромонады Porphyromonas spp.	До 10 3
Фузобактерии Fusobacterium spp.	До 10 3
Вейлонеллы Veilonella spp.	До 10 3
Микоплазмы M.hominis	До 10 3
Уреаплазмы U.urealyticum	10 3
Кандиды - дрожжеподобные грибы	10 4

Аббревиатура КОЕ/мл означает - колониеобразующих единиц в 1 мл питательной среды. Каждая колониеобразующая единица - это микроорганизм, из которого может образоваться колония.

Число бактерий выражают в десятичных логарифмах, для того, чтобы не писать числа с большим количеством нолей.

В описании влагалищной микрофлоры часто можно встретить названия грамположительные или грамотрицательные бактерии . Эти термины означают, что первые бактерии окрашиваются по методу, разработанному микробиологом Граммом, а другие при этом не изменяют свою окраску.

Грамположительные палочки в мазке , к которым относятся лактобактерии, являются хорошим признаком. В норме они преобладают у женщин репродуктивного возраста. В период менопаузы (климакса) и постменопаузы на первое место выходят грамотрицательные бактерии.

В зависимости от потребности в кислороде бактерии разделяют на

• аэробные - те, что развиваются при наличии кислорода;
• анаэробные - для жизнедеятельности которых не нужен кислород.

Во влагалище здоровой женщины большинство бактерий анаэробы 10 8 -10 9

КОЭ/мл.

Как делают мазок на микрофлору влагалища?

Взятие мазка происходит в кабинете врача-гинеколога. Также женщина может пройти это исследование в частной лаборатории.

Процедура включает несколько этапов.

1. Женщина размещается в гинекологическом кресле.
2. Введение стерильных гинекологических зеркал для получения доступа к стенкам влагалища и шейке матки.
3. Сбор материала с задней стенки влагалища. Эта процедура абсолютно безболезненна. Неприятные ощущения могут возникнуть льшь при прикосновении шпателя к воспаленному участку.
4. Нанесение материала на предметное стекло. Влагалищный секрет распределяют штриховыми движениями по обезжиренному стеклу максимально тонким слоем, чтобы клетки располагались в один ряд и не закрывали друг друга.
5. Фиксация мазка необходима, если его доставят в лабораторию более чем через 3 часа. Обработка позволяет избежать деформации клеток при высыхании и дает возможность сохранить препарат.
6. Окраска мазка по методу Грама. В качестве красителя используется метиленовый синий. После окрашивания легче установить вид бактерий и определить состав микрофлоры.
7. Оценка результата, которая состоит из 3-х частей: подсчет лейкоцитов, видовой состав микрофлоры, оценка чистоты влагалища.

Зачастую мазок берут сразу из трех точек:

• отверстия мочеиспускательного канала и парауретральных ходов (узких каналов, расположенных параллельно уретре);
• стенок влагалища;
• канала шейки матки.

Анатомическая близость этих участков приводит к тому, что инфекции и воспаления протекают взаимосвязано. Для каждого участка используется отдельный стерильный шпатель, щеточку или ватный тампон. Взятый материал наносят на 3 стерильных предметных стекла, отдельно для каждого участка.
Мазок на флору из влагалища абсолютно безвредная процедура, которая разрешена, в том числе и беременным женщинам. Во время забора материала слизистая не травмируется, поэтому после процедуры нет никаких ограничений. Разрешается принимать ванну, плавать, вступать в половые контакты и т.д.

Как подготовиться к этому мазку?

Сдавать мазок на флору необходимо не ранее чем через 3 дня после окончания менструации. Клетки менструальной крови в мазке могут исказить его результаты. Оптимальным считается период с 10-го по 20-й день цикла.
Результат анализа будет максимально достоверным, если придерживаться следующих правил.

• за 14 дней прекратить прием антибиотиков и противогрибковых препаратов;
• за 2 дня прекратить введение любых влагалищных форм препаратов - растворов, свечей, таблеток, тампонов, мазей, кремов;
• за 2-3 суток воздержаться от половых актов;
• перед процедурой нельзя спринцеваться и мыть внутри влагалища.

Что показывает мазок на микрофлору влагалища?

Мазок на микрофлору влагалища показывает наличие ряда заболеваний и патологических состояний.

• Половые инфекции (инфекции, передающиеся половым путем) . О них свидетельствует присутствие в мазке значительного числа уреаплазм , микоплазм , гарденелл, гонококков, трихомонад и других болезнетворных бактерий.
• Воспаление влагалища (вагинит, кольпит) или канала шейки матки (цервицит и эндоцервицит). Свидетельство воспалительного процесса - большое число лейкоцитов в мазке.
• Дисбактериоз влагалища . Нарушение состава микрофлоры способствует развитию заболеваний половой сферы. Дисбактериоз диагностируется в том случае, когда снижается количество лактобактерий, и начинают преобладать другие виды микроорганизмов.
• Кандидоз или молочница. В норме допустимы единичные грибки рода Кандида. При грибковом поражении их количество резко увеличивается, в мазке обнаруживается псевдомицелий - нити удлиненных клеток и клетки-почки, сидящие на них.

В мазке на флору оцениваются следующие показатели:

4 степени чистоты влагалища

Степень	Выявленные изменения	О чем говорит
I	Среда кислая. Лейкоциты - до 10. Эпителиальные клетки - 5-10. Большинство микроорганизмов - лактобактерии (палочки Дедерлейна). Другие бактерии - единично. Слизь - небольшое количество.	Идеальное состояние микрофлоры влагалища. Крайне редко встречается у женщин детородного возраста, живущих половой жизнью.
II	Среда слабокислая. Лейкоциты - до 10. Эпителиальные клетки 5-10. Большинсто - палочки Дедерлейна. Грамположительные кокки в небольшом количестве. Слизь в небольшом количестве.	Нормальное состояние. Встречается у большинства здоровых женщин.
III	Среда нейтральная. Лейкоциты - свыше 10. Эпителиальные клетки - свыше 10. Микроорганизмы в умеренном или большом количестве. Присутствуют грамотрицательные и грамотрицательные палочки и кокки. Единичные палочки Дедерлейна. Присутствуют «ключевые» клетки. Слизь - умеренное количество.	Воспаление влагалища - кольпит. Могут возникнуть симптомы: кремообразные выделения из влагалища, зуд, жжение, дискомфорт во время полового акта. У некоторых женщин это состояние протекает бессимптомно.
IV	Среда нейтральная или щелочная, рН свыше 4,5. Лейкоциты - свыше 30-ти или все поле зрения. Эпителиальные клетки - в большом количестве. Микроорганизмы в массивном количестве. Микрофлора представлена различными условно-патогенными и болезнетворными микроорганизмами. Палочки Дедерлейна могут отсутствовать. Слизь в большом количестве.	Выраженный воспалительный процесс. Симптомы: обильные выделения из влагалища (белые, желтоватые, зеленоватые), часто с неприятным запахом. Зуд, жжение, сухость, дискомфорт. Неприятные ощущения, боль при половом акте.

Какова норма мазка на микрофлору влагалища?

В микроскопии мазка на флору нормой считается:

• плоские клетки вагинального эпителия - до 10-ти в поле зрения;
• единичные лейкоциты - до 10-ти в поле зрения;
• клетки промежуточного слоя - единичные;
• «ложноключевые» клетки - редко;
• общее количество микроорганизмов «умеренное», иногда «большое»;
• слизь - в небольшом количестве;
• среди бактерий преобладают лактобактерии, другие типы микроорганизмов единичные, встречаются редко.

В мазке не должно быть:

• Разрушенных клеток эпителия в большом количестве . Это свидетельствует о лизисе клеток, что случается при аномальном росте лактобактерий.
• Ключевых клеток . Это клетки эпителия покрытые различными бактериями.
• Парабазальных клеток . Клетки нижних слоев слизистой. Их появление говорит о значительном воспалении либо атрофии слизистой.
• «Массивного» количества бактерий , кроме лактобактерий.
• Дрожжевые клетки с псевдомицелием и бластопорами (клетками-почками). Их присутствие указывает на молочницу .
• Строгих анаэробов - большинство из них относятся к возбудителям болезни.
• Гонококков - возбудителей гонореи .
• Трихомонад - возбудителей трихомониаза .
• Атипичных клеток, которые являются признаком предраковых или онкологических изменений.

Некоторые микроорганизмы (хламидии , различные вирусы) не обнаруживаются при осмотре под микроскопом из-за их маленького размера. Для их выявления необходим анализ крови на РПЦ.

О чем говорят лейкоциты в мазке на флору влагалища?

Лейкоциты - это белые клетки крови, которые призваны бороться с инфекцией. Они могут выходить сквозь стенку сосудов и передвигаться самостоятельно. Лейкоциты обладают способностью к фагоцитозу - они поглощают бактерии и переваривают их. После того, как бактерия переварена, лейкоцит разрушается. При этом освобождаются вещества, которые вызывают воспаление, проявляющееся отеком и покраснением слизистой.
В норме количество лейкоцитов во влагалище не должно превышать 10. Большое количество лейкоцитов говорит о воспалении. Чем выше число лейкоцитов, тем сильнее выражен воспалительный процесс.

Зачем производят чувствительность к антибиотикам при исследовании мазка?

Чувствительность к антибиотикам или антибиотикограмма - выяснение чувствительности бактерий к антибиотикам . Исследование проводят одновременно с посевом мазка при обнаружении во влагалище болезнетворных бактерий, вызывающих воспаление или половые инфекции.

Существует большое количество антибиотиков, но не все они одинаково эффективны по отношению к разным группам бактерий (на вирусы антибиотики не влияют). Случается, что после курса антибиотиков пациентка не выздоровела или болезнь вернулась через несколько дней/недель. Это произошло, потому что для лечения были назначены антибиотики, слабо влияющие на возбудителя болезни.
Для того чтобы лечение было максимально эффективным необходимо определить, какие антибиотики:

• полностью уничтожают бактерию - возбудителя болезни;
• останавливают рост возбудителя;
• не влияют на жизнедеятельность данной бактерии.

На основе проведенного исследования составляется антибиотикограмма . Это перечень антибиотиков, к которым чувствительны бактерии.

Как происходит исследование на чувствительность к антибиотикам?

После того, как были определены бактерии, вызвавшие болезнь, их распределяют в несколько пробирок с питательными средами. В каждую пробирку добавляют определенный антибиотик. Пробирки помещают в термостат, где созданы оптимальные условия для их размножения.

После культивации (около 7 дней) анализируют рост бактерий в пробирках. Там, где бактерии чувствительны к антибиотику, колоний не образуется. Этот препарат оптимальный для лечения пациентки. В пробирку, где добавлены препараты, к которым антибиотики нечувствительны, рост бактерий самый интенсивный. Такие лекарственные средства не могут быть использованы для лечения данного заболевания.

Что такое посев мазка?

Посев мазка или бактериологический посев (бакпосев) мазка - это лабораторное исследование, при котором содержимое влагалища помещают в питательную среду и создают оптимальные условия для роста бактерий.

Цели исследования :

• определить возбудителя инфекции половых органов;
• установить степень обсемененности - количество бактерий во влагалище;
• контролировать состояние микрофлоры после длительного лечения антибиотиками, цитостатическими препаратами. Проводится через 7-10 дней после отмены препарата.

В каком случае назначают посев мазка?

• всем беременным женщинам при постановке на учет;
• при воспалительных процессах в половых органах;
• в мазке обнаружены грамотрицательные диплококки - для подтверждения гонококковой инфекции (гонореи);
• при вульвовагините рецидивирующем или хроническом.

Как проводится микробиологическое исследование?

Отделяемое влагалища помещают в питательные среды - растворы или желеобразные массы, в которых имеются питательные вещества для бактерий. Пробирки и чашки Петри на 3-5 дней помещают в термостат, где постоянно поддерживается температура около 37 градусов, оптимальная для размножения микроорганизмов.

После культивации лаборант оценивает результаты. Из каждого микроорганизма в процессе деления вырастает целая колония бактерий. По ее внешнему виду лаборант определяет вид возбудителя. А по количеству колоний можно судить о концентрации данных микроорганизмов во влагалище. Далее концентрацию сравнивают с нормальными показателями.
Значимыми считаются те бактерии, концентрация которых превышает 10 4 КОЭ/мл. При данной концентрации микроорганизмы способны вызвать заболевание. При обнаружении такого количества бактерий результат анализа считается положительным .

В заключении, выдаваемом лабораторией, указывается:

• вид микроорганизма, который преобладает в мазке;
• патогенность микроорганизма - способность вызывать заболевание:

• Патогенный - присутствие которого может быть вызвано только болезнью.
• Условно-патогенный - бактерии, которые вызывают болезнь только при снижении иммунитета, при значительном увеличении их численности.

• концентрация микроорганизма во влагалище. В числовом показателе и в виде словесной характеристики: «скудно», «умеренный рост», «обильный рост».

В лабораторном заключении количество и рост бактерий может характеризироваться степенью:

Степень	Особенности роста бактерий
	Жидкая питательная среда	Плотная питательная среда
I	Рост очень скудный.	Рост бактерий отсутствует.
II	Умеренный рост	До 10 колоний бактерий.
III	Обильный рост.	От 10 до 100 колоний.
IV	Массивный рост.	Свыше 100 колоний.

I степень является нормой. При II степени говорят о нарушении микрофлоры влагалища. III-IV степени свидетельствуют о заболевании, вызванном данным видом бактерий.

Микрофлора половых путей в различные периоды жизни женщины неодинакова и отражает влияния комплекса факторов внутренней и внешней среды. При беременности, протекающей без патологии, плод стерилен. Перед рождением и в раннем постнатальном периоде слизистая оболочка влагалища находится под преимущественным влиянием эстрогенов и прогестерона плацентарного происхождения, гормонов матери, прошедших через гематоплацентарный барьер, и гормонов, поступивших к ребёнку с молоком матери. В этот период слизистая оболочка состоит из 3–4 слоёв плоского эпителия промежуточного типа. Эпителиальные клетки способны продуцировать гликоген и тем самым поддерживать жизнедеятельность молочнокислых бактерий. Есть мнение, что в норме, сразу после рождения и в первые часы жизни, влагалище у новорождённой заполнено густой слизью и потому стерильно. Спустя 3–4 часа после родов у новорождённой, вместе с усилением процесса десквамации эпителия и помутнением шеечной слизи, во влагалище обнаруживают лактобациллы, бифидобактерии и коринебактерии, а также единичную кокковую микрофлору. К концу первых суток после рождения влагалище новорождённой колонизируют аэробные и факультативно- анаэробные микроорганизмы. Через несколько дней эпителий, выстилающий влагалище, накапливает гликоген - идеальный субстрат для размножения лактобактерий, формирующих микрофлору влагалища новорождённой на этот момент.

Гормоны яичников, стимулируя рецепторную активность эпителия влагалища, также способствуют активной адгезии лактобактерий на поверхности эпителия. Лактобактерии расщепляют гликоген с образованием молочной кислоты, что приводит к сдвигу рН влагалищной среды в кислую сторону (до 3,8–4,5). Это ограничивает рост и размножение микроорганизмов, чувствительных к кислой среде. Бифидобактерии, также как и лактобактерии, защищают слизистую оболочку влагалища от воздействия не только патогенных, но и условно–патогенных микроорганизмов, их токсинов, препятствуют распаду секреторного IgА, стимулируют образование интерферона и выработку лизоцима. Резистентность организма новорождённой обусловливает высокое содержание IgG, поступившего через плаценту от матери. В этот период влагалищная микрофлора у новорождённой сходна с микрофлорой влагалища здоровых взрослых женщин. Через три недели после рождения у девочек происходит полное разрушение материнских эстрогенов. В это время эпителий влагалища тонкий и легко ранимый, представлен только базальными и парабазальными клетками. Содержание гликогена в нём уменьшено, что приводит к снижению количества нормальной микрофлоры, прежде всего лактобактерий, а также к снижению уровня органических кислот, продуцируемых ими. Снижения уровня органических кислот приводит к повышению рН влагалищной среды с 3,8–4,5 до 7,0–8,0. В этой среде в микрофлоре доминируют строгие анаэробы. По данным специалистов, через три недели после рождения микрофлора половых путей девочек представлена преимущественно кокковой микрофлорой, во влагалищных мазках определяют единичные лейкоциты и эпителиальные клетки. Для второго месяца жизни и течения всего пубертатного периода, вплоть до активации овариальной функции, характерно снижение общего количества микроорганизмов во влагалище. И.В. Садолина (2000 г.) изучила микробиоценоз влагалища у здоровых девочек 5–8 лет.

Наиболее часто в качестве представителей аэробной и факультативноанаэробной микрофлоры обнаруживают эпидермальных и сапрофитных стафилококков, реже - кишечную палочку и энтеробактерии, в единичных случаях бифидобактерии и лактобактерии. У 70% здоровых девочек в состав индигенной микрофлоры влагалища входят бактерии с гемолитическими свойствами. Общее микробное число составило от 102 КОЕ/мл до 105 КОЕ/мл. По данным ряда авторов, источник белей, увлажняющих атрофическую слизистую оболочку вульвы и влагалища, у здоровых девочек - незначительная транссудация из сосудистой и лимфатической сети подэпителиального слоя влагалищной стенки и вульвы. Очищение влагалища происходит благодаря фагоцитарной функции макрофагов и полиморфноядерных лейкоцитов. Снижение уровня защиты в этот период компенсируют особенности строения наружных половых органов. За счёт тонкой полулунной или кольцевидной ригидной девственной плевы вульварное кольцо зияет. Оно расположено глубоко в ладьевидной ямке и отграничено от анального отверстия высокой задней спайкой, что в норме препятствует массивному обсеменению нижних половых путей экзогенной микрофлорой. Такое состояние половых путей обычно отмечают у девочек от 1 мес до 7–8 лет жизни.

В составе микрофлоры влагалища девочек препубертатного возраста (9–12 лет) вплоть до менархе преобладают анаэробные и микроаэрофильные микроорганизмы: бактероиды, стафилококки, дифтероиды. Отмечают большое количество лактобактерий и молочнокислых стрептококков. В этот период микробиоценоз влагалища относительно стабилен. C момента активации овариальной функции организм девушки синтезирует «собственные», эндогенные эстрогены. Под влиянием эстрогенов клетки эпителия влагалища накапливают гликоген. Это приводит к формированию эстрогенстимулированного эпителия. На поверхности эпителиоцитов влагалища увеличено число рецепторных участков для адгезии лактобактерий, увеличена толщина эпителиального слоя. С этого момента лактобактерии - доминирующие микроорганизмы микрофлоры влагалища, и в последующем они сохранят это положение на протяжении всего репродуктивного периода. Метаболизм лактобактерий способствует стабильному сдвигу рН среды влагалища в кислую сторону до 3,8–4,5. Во влагалищной среде растёт окислительновосстановительный потенциал. Это создает неблагоприятные условия для роста и размножения строго анаэробных микроорганизмов. Микрофлора влагалища этого периода подвержена циклическим изменениям и представлена доминирующим пулом Н2О2продуцирующих лактобактерий.

Общее микробное число составляет 105–107 КОЕ/мл, количественно анаэробы преобладают над аэробами, также встречают представителей семейства Enterobacteriaceae.

Пубертатный, или подростковый, период (до 15 лет) характеризует ритмичная физиологическая гипертранссудация в виде слизистых выделений. Увеличено количество эпителиальных слоёв, а кольпоцитологическая картина приближена к таковой у взрослой женщины. Общее микробное число составляет 105–107 КОЕ/мл. В 60% случаев определяют лактобациллы, среда влагалища становится кислой, рН 4,0–4,5. В юношеском возрасте (с 16 лет) микробиоценоз половых путей соответствует таковому у женщин репродуктивного возраста.

Микробиоценоз влагалища у женщин репродуктивного возраста в норме состоит из постоянно обитающих микроорганизмов (индигенная, автохтонная микрофлора) и транзиторных (аллохтонная, случайная микрофлора) (табл. 20- 1). Индигенная микрофлора превосходит по численности популяции случайную, однако количество видов, представляющих автохтонную микрофлору, не так велико, как видовое разнообразия аллохтонных микроорганизмов.

Общая численность транзиторных микроорганизмов в норме не превышает 3–5% от всего пула микроорганизмов микробиоценоза.

Таблица 20-1. Влагалищная микрофлора (микробиоценоз)

У здоровых женщин репродуктивного возраста общее количество микроорганизмов во влагалищном отделяемом составляет 6–8,5 lg КОЕ/мл. Их разнообразие достигает 40 и более видов.

У здоровых женщин репродуктивного возраста во влагалищной среде доминируют лактобациллы, составляющие 95–98% биотопа. В микробиоценозе влагалища здоровых женщин присутствуют 9 видов лактобактерий аэробного и анаэробного происхождения. Их титр достигает 108–109 КОЕ/мл. Для обеспечения оптимальных физиологических условий во влагалище клинической значимостью обладают виды Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus spp., Bifidobacterium spp. и др. Значительно меньшую долю составляют облигатно–анаэробные виды лактобацилл. Несмотря на разнообразие видового состава лактобацилл, выделенных из влагалища здоровых женщин (более 10 видов), не удается определить ни одного вида, присутствующего у всех женщин. Чаще всего выделяют следующие виды лактобацилл: L. Acidophilus, L. Brevis, L. jensenii, L. Casei, L. leishmanii, L. plantarum.

Эстрогензависимая способность лактобацилл к адгезии на эпителиальных клетках влагалища, продукция перекиси водорода и антибиотикоподобных веществ препятствуют размножению ацидофобных бактерий и росту условнопатогенных микроорганизмов, количество которых у здоровых женщин на 2–5 порядков ниже, чем количество доминирующей группы лактобацилл. Среди условнопатогенных микроорганизмов обнаруживают непатогенные грамположительные палочки рода Corynebacterium и коагулазоотрицательные стафилококки. Способность вырабатывать каталазу помогает выживанию коринебактерий в созданной лактобациллами перекисной среде. В популяции облигатноанаэробных бактерий обращают внимание на группу бактероидов, превотелл и пептострептококков, обнаруживаемых в низких титрах у 55% здоровых женщин. Нормальная микрофлора женских половых органов чрезвычайно многообразна и представлена аэробными, факультативными и строго анаэробными микроорганизмами, причем анаэробы в видовом и количественном отношении доминируют над остальными. Во влагалищной среде обнаруживают не менее 61 фенотипа микроорганизмов, но их набор относительно постоянный, если женщина здорова на протяжении значительного времени. Генитальный тракт в репродуктивном периоде колонизирован комплексной микрофлорой. Исследования влагалищной микрофлоры у здоровых женщин свидетельствуют о том, что у 87–100% женщин обнаруживают аэробные микроорганизмы. Из них чаще встречают лактобактерии (45–88%), стрептококки (53–68%), энтерококки (27–32%), коагулазонегативные стафилококки (34–92%) и колиформные микроорганизмы.

Колонизационная резистентность влагалища обусловлена резидентной микрофлорой, представленной у женщин репродуктивного возраста обширной группой лактобацилл. Благодаря специфической адгезии на эпителиальных клетках влагалища возникает биоплёнка, образованная микроколониями лактобацилл, окружёнными продуктами их метаболизма - гликокаликсом. Кроме лактобактерий обнаружены грамположительные палочки: эубактерии и несколько реже - бифидобактерии. У небольшого числа женщин выделены микроорганизмы, принадлежащие к роду Clostridium. Из грамположительных кокков у большинства женщин высевают Peptоstreptococcus spp. и Peptococcus sрр. Снижение количества или исчезновение из влагалищной среды лактобацилл способствует развитию инфекционных заболеваний.

Результаты современных исследований характеризуют влагалищную микроэкосистему как весьма динамичную и многокомпонентную по видовому составу. Частые представители нормальной микрофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста помимо лактобацилл - анаэробные грамотрицательные палочки рода Fusobacterium и грамотрицательные кокки рода Veillonella. Среди транзиторных микроорганизмов влагалища чаще других удается выделить коагулазоотрицательные стафилококки и в первую очередь Staphylococcus epidermidis. Кроме того, Corynebacterium spp., BacteroidesPrevotella spp., Mycoplasma hominis, присутствующие в умеренном количестве (до 4 lг КОЕ/мл). Столь же часто, но в меньшем количестве встречают Micrococcus spp., Propionibacterium spp., Veillonella spp., Eubacterium spp. Сравнительно редко (менее чем у 10% обследованных) обнаруживают Clostridium spp., Bifidobacterium spp., Actinomyces spp., Fusobacterium spp., Ureaplasma urealyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria spp., E. coli и другие колиформные бактерии; Mycoplasma fermentans, Candida spp. Mycoplasma hominis и Gardnerella vaginalis высеивают из материала 10–75% здоровых женщин без какойлибо клинической симптоматики.

Видовое разнообразие влагалищной микрофлоры велико, а возможные сочетания микроорганизмов столь многочисленны, что определенны лишь некоторые общие тенденции их сосуществования. Большинство исследователей считают, что у здоровых женщин кроме лактобацилл во влагалище обнаруживают непатогенные коринебактерии и коагулазоотрицательные стафилококки - у 60–80% обследованных. Среди облигатноанаэробных бактерий значение имеет группа Bacteroides–Prevotella, играющая роль этиологических агентов при воспалительных заболеваниях гениталий. Эти бактерии выделены в низких титрах у 55% здоровых женщин.

В табл. 20-2 приведены данные о видовом составе микроорганизмов - типичных представителей микробиоценоза вульвы, влагалища и цервикального канала.

Таблица 20-2. Видовой состав нормальной микрофлоры вульвы, влагалища и цервикального канала женщин в репродуктивном периоде

Окраска по Граму	Факультативные микроорганизмы	Анаэробные микроорганизмы
Грамположительные кокки	Staphylococcus epidermidisStaphylococcus aureus*Group D StreptococcusB–Hemolytic Streptococcus	Peptococcus species*Peptococcus anaerobiusPeptococcus asaccharolyticusPeptococcus prevotii*Peptococcus variabilisPeptostreptococcus species*Peptostreptococcus anaerobius
Грамотрицательные кокки		Veillonella speciesAcidominococcus fermentas
Грамположительные палочки	Lactobacillus species*Corinebacterium species	Lactobacillus species*Bifidobacterium species*Clostridium speciesEubacterium speciesPropionibacterium species
Грамотрицательные палочки	Echerichia coli*Klebsiella speciesДругие виды семейства EnterobacteriaceaeGardnerella vaginalis*	Bacteroides melaninogenicus*Bacteroides vulgatus*Bacteroides species*Fusobacterium nucleatum*Fusobacterium species (группа Sphaerophorus)*Leptotrichia speciesCampylobacter species «anaerobic vibrios»

* Микроорганизмы с наибольшим клиническим значением.

У здоровых женщин чаще во влагалище обнаруживают лактобациллы, непатогенные коринебактерии и коагулазонегативные стафилококки. Среди облигатноанаэробных бактерий превалируют Bacteroides и Prevotella. Строгие анаэробы - часть сложной микроэкологической системы, обеспечивающей равновесие, необходимое для нормального функционирования половых органов в разные периоды жизни женщины. Собственную микрофлору имеют наружные половые органы, влагалище и цервикальный канал. Установлено, что видовые и количественные различия в нормальной микрофлоре женских половых путей зависят от рассматриваемой анатомической области. В преддверии влагалища у здоровых и небеременных доля анаэробов составляет 32–45%, во влагалище - 60%, в цервикальном канале - 84%.

В верхних отделах влагалища доминируют лактобактерии и бифидобактерии. В цервикальном канале присутствуют эпидермальные стафилококки, пептострептококки и дифтероиды.

Микрофлора влагалища в репродуктивном возрасте подвержена циклическим колебаниям в зависимости от фаз менструального цикла. В первые дни цикла увеличивается pH среды влагалища до 5,0–6,0. Это связано с попаданием во влагалище большого числа дегенерированных клеток эндометрия и элементов крови. На этом фоне уменьшенно общее количество лактобацилл и относительно увеличена численность факультативных и облигатных анаэробных бактерий за счёт чего сохранено микробное равновесие. По окончанию менструации влагалищный биотоп быстро возвращается к исходному состоянию. Популяция лактобацилл быстро восстанавливается и достигает максимального уровня в середине секреторной фазы, когда содержание гликогена в эпителии влагалища самое большое. Этот процесс сопровождает увеличение содержания молочной кислоты и снижение рН до 3,8–4,5. Во второй фазе менструального цикла доминируют лактобациллы, а количество облигатных анаэробов и колиформных бактерий снижено Приведённые данные позволяют предположить, что в первой (пролиферативной) фазе менструального цикла восприимчивость организма женщины к инфекции возрастает. Известно, что продукция молочной кислоты во влагалище обусловлена расщеплением гликогена молочнокислыми бактериями. Количество гликогена в слизистой оболочке регулирует концентрация эстрогенов. Существует прямая связь между количеством гликогена и продукцией молочной кислоты. Кроме того, обнаружено, что некоторые виды стрептококков, стафилококков, грамотрицательных бактерий и дрожжевых грибов, представляющих нормальную микрофлору здоровой женщины, также способны расщеплять влагалищный гликоген с выделением метаболитов, используемых палочками Додерлейна для продукции кислоты.

В настоящее время установлено, что влагалищной микрофлоре присущи ферментативная, витаминообразующая, иммунизирующая и другие функции. Её следует рассматривать не только как индикатор состояния влагалища. Нормальная бактериальная микрофлора выполняет антагонистическую роль, препятствуя инвазии патогенных микроорганизмов. В климактерическом периоде прогрессирующий дефицит эстрогенов, обусловленный истощением яичников, вызывает развитие возрастных атрофических изменений слизистой оболочки мочеполового тракта. Влагалищная атрофия приводит к снижению содержания гликогена в эпителии влагалища, снижению колонизации лактобациллами и уменьшению количества молочной кислоты. Как и в подростковом периоде, в климактерии происходит увеличение рН влагалищной среды до 5,5–7,5. Влагалище и нижние мочевые пути колонизируют грамотрицательные факультативноанаэробные виды семейства энтеробактерий, в основном кишечная палочка, и типичные представители микрофлоры кожных покровов.

При условном нормоценозе и влагалищной атрофии массивного заселения влагалища УПМ не наблюдают, и воспалительные изменения стенок влагалища отсутствуют. Главный отличительный признак влагалищной атрофии - отсутствие (в 66,4% случаях) или резкое снижение (у 33,6% женщин) титра лактобацилл. Выраженность атрофии тесно коррелирует с выраженностью смещения рН влагалищной среды в щелочную сторону. Описанные состояния у женщин в постменопаузе сохраняются длительные годы без присоединения вторичной инфекции. По мнению В. Е. Балан (1998), защитную функцию исчезнувших из биотопа влагалища лактобактерий у женщин в постменопаузе берут на себя лимфоидные клетки, представляющие натуральные киллеры (СD5б) и клетки супрессорноцитотоксического ряда (СD8), а также клетки моноцитарномакрофагального ряда (СD14).

Влияние на количественный и видовой состав микрофлоры влагалища оказывают хирургические травмы или инвазивные опухолевые процессы, снижающие сопротивляемость тканей к бактериальным инфекциям. Вероятно, повреждение тканей при хирургических вмешательствах, снижение их окислительновосстановительного потенциала и развитие ишемии создают условия для размножения отдельных представителей нормальной микрофлоры. В большинстве случаев инфекционные осложнения после кесарева сечения и гистерэктомии обусловлены именно «загрязнением» операционного поля эндогенной флорой, и прежде всего анаэробами. Считают, что обсеменение экзогенными микробами в этих условиях бывает реже.

Широкое использование антибиотиков оказывает влияние на нормальную микрофлору человека. Большое число работ, посвящённых профилактическому применению антибиотиков в гинекологической практике, констатируют увеличение числа видов микроорганизмов, устойчивых к действию применяемых препаратов. Для оценки состояния микрофлоры влагалища используют оригинальную классификацию микроскопической характеристики биоценоза влагалища (Кира Е. Ф., 1995), разработанную с учётом достижений клинической микробиологии и современных диагностических возможностей (табл. 20-3). В ней отражены 4 типа (состояния) микробиоценоза влагалища, микроскопические признаки каждого типа и соответствующие каждому типу нозологические формы.

Современные достижения клинической микробиологии позволили выделить 4 типа микробиоценоза на основе микроскопической картины.

• Нормоценоз:
  ♦доминирование лактобацилл;
  ♦отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов;
  ♦наличие единичных лейкоцитов и «чистых» эпителиальных клеток.
• Промежуточный тип микробиоценоза влагалища:
  ♦умеренное или незначительное количество лактобацилл;♦наличие грамположительных кокков, грамотрицательных палочек;
  ♦обнаружение лейкоцитов, моноцитов, макрофагов, эпителиальных клеток.
• Дисбиоз влагалища:
  ♦незначительное количество или полное отсутствие лактобацилл;
  ♦обильная полиморфная грамотрицательная и грамположительная палочковая и кокковая микрофлора;
  ♦наличие ключевых клеток, вариабельное количество лейкоцитов, отсутствие фагоцитоза, его незавершённость.
• Вагинит:
  ♦полимикробная картина мазка;
  ♦большое количество лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, наличие выраженного фагоцитоза.

Таблица 20-3. Микроскопическая характеристика биоценоза влагалища (Кира Е.Ф.,1995)

Состояние (тип) биоценоза	Характеристика признаков	Нозологические формы
Нормоценоз	Доминирование лактобактерий, отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов, лейкоцитов, единичные «чистые» эпителиальные клетки	Типичное состояние нормального биотопа влагалища
Промежуточный тип	Умеренное или сниженное количество лактобактерий, наличие грамположительных кокков, грамотрицательных палочек. Обнаруживают лейкоциты, моноциты, макрофаги, эпителиальные клетки	Часто наблюдают у здоровых женщин, редко сопровождается субъективными жалобами и клинической картиной
Дисбиоз влагалища	Незначительное количество или полное отсутствие лактобактерий, обильная полиморфная грамотрицательная и грамположительная палочковая и кокковая микрофлора; наличие «ключевых клеток». Количество лейкоцитов вариабельно, отсутствие или незавершенность фагоцитоза. Полимикробная картина мазка	Бактериальный вагиноз
Вагинит (воспалительный тип мазка)	Большое количество лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, выраженный фагоцитоз. При обнаружении: гонококков, трихомонад, мицелия, псевдогифов, спор.	Неспецифический вагинит
	При обнаружении: гонококков, трихомонад, мицелия, псевдогифов, спор.	Гонорея, трихомоноз, микотический вагинит

Картина нормоценоза отражает типичное состояние нормального биотопа влагалища. Промежуточный тип микробиоценоза влагалища - пограничный тип, его часто наблюдают у здоровых женщин, без субъективных жалоб и клинической симптоматики. Дисбиоз влагалища соответствует микробиологической картине бактериального вагиноза. Вагинит соответствует неспецифическому вагиниту. При обнаружении возбудителей специфических инфекций (гонококков, трихомонад, мицелия, псевдогифов, спор и т.д.) ставят этиологический диагноз. Предложенная классификация сочетает в себе микробиологическую интерпретацию влагалищного мазка, характеристику клинической картины и соответствующую конкретную нозологическую форму, определяющую решение о необходимости лечения. Классификация отражает современный уровень знаний и интерпретацию как микробиологических (бактериоскопических), так и клинических данных. Расшифровка, понимание механизмов, обеспечивающих физиологическую роль индигенной микрофлоры влагалища, открывают пути к профилактике различных патологических состояний.

Таким образом, в соответствии с концепцией экологической ниши половые пути женщины можно представить как совокупность участков нескольких типов, включающих плоский эпителий влагалища, цилиндрический эпителий шейки матки и уникальную среду цервикальных желёз. Для участков характерны определённые биохимические и физиологические свойства, что обусловливает их заселение различными популяциями микроорганизмов. В женских половых органах постоянно происходят циклические изменения, связанные прежде всего с функцией яичников. Следовательно, нормальную микрофлору влагалища можно представить в виде динамической системы, подверженной в физиологических условиях гормональному влиянию менструального цикла, ритма половой жизни, беременности, индивидуальных гигиенических мероприятий. На микрофлору воздействуют инвазивные диагностические и лечебные манипуляции, применение антибиотиков, цитостатиков, гормональных препаратов, ионизирующее излучение, хирургические вмешательства и др. Однако, несмотря на постоянные изменения, микрофлора гениталий относительно стабильна. Понимание этого факта скрыто за недостаточно изученными механизмами саморегуляции микробной популяции макроорганизма.

Микрофлора влагалища в норме - один из факторов неспецифической резистентности. Однако в определённых условиях (после родов, абортов, гинекологических операций) микроорганизмы вызывают инфекционные заболевания, а участки половых путей с эндогенной микрофлорой становятся источниками инфицирования. При этом особого внимания заслуживают бесспоровые анаэробные бактерии, такие как бактероиды, фузобактерии, пептококки, пептострептококки, вейллонеллы и др. Эти бактерии присутствуют в микрофлоре половых органов женщины в течение всей жизни. Ввиду динамичности этой экосистемы под влиянием гормональных и других воздействий определение микрофлоры половых путей возможно с учётом конкретных физических и физиологических условий.

Жизнь — очень цепкая штука. Однажды зародившись, теперь она не собирается никуда уходить. Микроорганизмы распространены буквально в каждом уголке земного шара, от сдавленных чудовищным давлением пластов горной породы до запущенных человеком орбитальных станций.

Природа приспосабливается к удивительному разнообразию внешних условий, иногда даже превосходя границы людского воображения. Известнейшим примером этого является плесень на международной космической станции «Мир» , выросшая снаружи иллюминаторов. То есть в открытом космосе.

Поэтому уже совершенно не удивляет то, что микро-, а иногда и макроорганизмы способны жить и процветать там, где человеку не выжить. Но всё же иногда природа удивляет своей внезапной противоречивостью, как будто некоторые организмы прибыли к нам с других планет. Одним из таких внезапных противоречий является облигатная анаэробность. Чтобы понять, что это такое, нужно разобрать процесс дыхания.

Дыхание

Для человека дыхание — это вентилирование лёгких воздухом для поглощения кислорода и вывода углекислого газа. Кислород нужен не только человеку, но многим другим организмам. Все эти организмы входят в одну большую группу — аэробы.

Термин «аэроб» происходит от греческого «аэр» — «воздух», и «биос» — «жизнь». Нетрудно догадаться, что таким термином обозначают те организмы, которым для жизни необходим воздух. А точнее, свободный молекулярный кислород, растворённый в этом воздухе.

Кислород необходим этим организмам для участия в реакциях окислительного фосфорилирования. Энергия в теле аэробов переносится и запасается в виде АТФ — аденозинтрифосфорной кислоты .

Эта кислота несёт в себе высокоэнергетические связи, гидролиз которых — взаимодействие с водой — высвобождает большое количество энергии. Поэтому АТФ используется природой для запасания этой энергии и последующего высвобождения для своих нужд.

АТФ образуется путём окисления питательных веществ, энергия из которых используется особым белком — АТФ-синтазой. АТФ-синтаза берёт эту энергию для той самой реакции фосфорилирования, в которой она превращает аденозиндифосфат в АТФ. В роли окислителя в этом цикле как раз используется кислород.

Явление облигатности

Облигатность означает обязательность, необходимость . Для облигатных аэробов кислород строго необходим, без него они умрут, так как не смогут проводить реакции окисления для получения энергии.

Однако кислород является сильным окислителем, поэтому организмы-аэробы в процессе дыхания подвергают себя значительным стрессам. Именно процессы окисления лежат в основе старения и естественной смерти.

Поэтому неудивительно, что в природе существуют анаэробы — организмы, которым не нужен кислород для процессов фосфорилирования.

Анаэробы

Термин «анаэроб» образован добавлением латинской приставки «ан-», означающей отрицание, к слову «аэроб». То есть анаэробный организм — это организм, которому не нужен воздух для жизни.

Однако мы уже выяснили, что кислород из воздуха используется в реакции окислительного фосфорилирования, где аденозиндифосфат превращается в аденозинтрифосфорную кислоту, запасая при этом энергию в высокоэнергетических связях. Как же анаэробы запасают энергию?

Анаэробы используют вместо окислительного субстратное фосфорилирование, в котором фосфат переносится на аденозиндифосфат напрямую с определённого промежуточного продукта. Такой продукт должен обладать особыми свойствами, чтобы реакция протекала только в одном направлении. Этими свойствами, например, обладают нитраты, креатинфосфорная кислота и прочие.

Анаэробные микроорганизмы встречаются везде, даже в человеческом теле . Клетки поперечно-полосатой мускулатуры являются факультативными — необязательными — анаэробами, или факультативными аэробами, смотря с какой точки зрения смотреть.

В обычных условиях они используют кислород для процессов запасания и освобождения энергии. Но при тяжёлых нагрузках мышцы раздуваются, пережимая собственный кровоток. Начинается явление гипоксии — пониженного содержания кислорода. В этих условиях клетки мышц начинают осуществлять анаэробное окисление глюкозы.

Облигатная анаэробность

Как и облигатные аэробы, которым жизненно необходим кислород, существуют и облигатные анаэробы — микроорганизмы, которым жизненно необходимо отсутствие кислорода. Как уже упоминалось, кислород является агрессивным окислителем. Аэробные организмы имеют особую систему защиты от этого — антиоксидантную систему.

Облигатные анаэробы не имеют в себе ферментов-антиоксидантов, поэтому они вынуждены либо жить в среде без кислорода, либо окружать себя антиоксидантным барьером. Без этого барьера в кислородной среде они быстро гибнут.

Мазок на флору - часто назначаемый гинекологами анализ. Что он показывает и какие заблуждения на его счет существуют?

Данный анализ можно назвать «общим». Это первичная диагностика, которая позволяет врачу подтвердить или опровергнуть наличие воспалительного процесса во влагалище, уретре, цервикальном канале, а также сделать определенные выводы относительно возможной менопаузы или климактерических изменений у пациентки.

Как точно называется анализ:

• микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка, окрашенного по Граму - это официальное название;
• мазок из половых органов;
• бактериоскопия;
• микроскопия.

Используется для диагностики инфекционно-воспалительных процессов. Бактериоскопия позволяет обнаружить в половых органах женщины бактерии: простейшие микроорганизмы - гонококки, провоцирующие гонорею, трихомонады - возбудителя трихомониаза. Также специалист в микроскоп увидит некоторые бактерии, грибы (Candida), ключевые клетки (признак бактериального вагиноза). Вид микроорганизма определяется по форме, размеру, а также тому - окрашиваются он красителем или нет, то есть является грамположительным или грамотрицательным.

Кроме того, в мазке из каждой точки (берут из влагалища, уретры, цервикального канала) подсчитывается количество лейкоцитов в поле зрения. Чем их больше - тем сильнее выражен воспалительный процесс. Оценивается количество эпителия и слизи. особенно много у женщин репродуктивного возраста в период овуляции - в середине менструального цикла.

Микроскопическое исследование отделяемого женских половых органов - это возможность быстро оценить - здорова гинекологически женщина или нет и поставить один из четырех диагнозов:

• вагинальный кандидоз (молочница);
• бактериальный вагиноз (ранее называли гарднереллезом);
• гонорея;
• трихомониаз.

Если четких признаков одного из этих заболеваний нет, но мазок плохой, проводится углубленное изучение материала - выполняется бакпосев.

Причины для выполнения посева в гинекологии

1. Если в мазке умеренное или большое количество лейкоцитов, но возбудитель инфекции не известен. Так как при микроскопии существует нижний предел выявляемости микроорганизмов: 10 в 4 - 10 в 5 степени.
2. Если микроб выявлен, чтобы определить его чувствительность к антибиотикам.
3. Если имеются признаки грибковой инфекции. Чтобы точно установить вид грибов и назначить эффективный антимикотический препарат.

   Некоторые разновидности грибков, например, Кандида Альбиканс (Candida albicans - диплоидный грибок), очень опасны для будущих мам и могут спровоцировать инфицирование и преждевременный разрыв плодных оболочек.

   Другие виды грибов Кандида можно не лечить, если нет патологических симптомов.

Если найдены ключевые клетки (признаки бактериального вагиноза), но кроме них присутствуют и другие микробы. Для идентификации.

В чем отличия между бакпосевом, мазком на флору и степень чистоты влагалища

В методе исследования. При общем мазке материал, нанесенный на стеклышко, окрашивают специальными красителями и смотрят под микроскопом. А когда делают бактериологическое (бакпосев, культуральное, микробиологическое) исследование, то его сначала «высеивают» на питательную среду. А потом, через несколько дней, смотрят под микроскопом - колонии каких микроорганизмов выросли.

То есть, если речь идет об экспресс анализе, вам дадут заключение только о количестве лейкоцитов, эпителия и слизи. Посев срочным не бывает

Также при микроскопии можно довольно быстро определить степень чистоты из влагалища. Здесь врач только оценивает соотношение между нормальной, условно-патогенной и патогенной микрофлорой.

Классическая оценка чистоты влагалища.

Обновленная таблица

Степени	Признаки
I	Палочки Дедерлейна, плоский эпителий.
II	Негноеродные бактерии. Лейкоциты в норме. Диагноз: негнойный бактериальный кольпит.
III	Гноеродные (стафилококки, стрептококки, синегнойная палочка, гонококки и т. д.) микроорганизмы. Высокий уровень лейкоцитов. Гнойный бактериальный кольпит.
IV	Гонорея (обнаружены гонококки).
V	Трихомониаз (обнаружен трихомонады).
VI	Вагинальный кандидоз (обнаружены грибы).

Что врачи не видят при микроскопии

1. Беременность. Чтобы ее определить, мазок не нужен и не важно какой результат он покажет. Необходимо сдать анализ крови на ХГЧ, пройти гинекологический осмотр у врача или сделать УЗИ матки. Можно определить хорионический гонадотропин в моче, но не в отделяемом из половых органов!
2. Рак матки и шейки матки. Чтобы диагностировать злокачественное перерождение эндометрия, необходим гистологический материал, причем в большом количестве. И забирают его непосредственно из матки .

   РШМ и другие патологии (эрозия, лейкоплакия, атипичные клетки и др.) ставят по результатам цитологического исследования. Данный анализ берется непосредственно с шейки матки, из зоны трансформации, по определенной методике с прокрашиванием по Папаниколау (отсюда и название анализа - ПАП-тест). Еще его называют онкоцитологией.

3. Не показывает такие инфекции (зппп) как :
   • герпес;
   • хламидиоз (хламидии);
   • микоплазмы (микоплазмоз);
   • уреаплазмы (уреаплазмоз);

Первые четыре инфекции диагностируются методом ПЦР. А определить наличие вируса иммунодефицита по мазку с высокой точностью невозможно. Нужно сдать анализ крови.

Как подготовиться к сдаче анализа и когда он необходим

Мазок врач берет у пациентки на гинекологическом кресле (независимо от того - беременна она или нет) с помощью специальной щеточки или стерильной ложечки Фолькмана. Это совсем не больно и очень быстро.

Добиться хорошего, даже идеального мазка технически можно, если санировать влагалище хлоргексидином или мирамистином, например. Но какой в этом смысл?

Чтобы получить достоверный результат мазка, за 48 часов до его сдачи нельзя:

• спринцеваться;
• заниматься сексом;
• использовать какие-либо вагинальные средства гигиены, интимные дезодоранты, а также лекарства, если они не были назначены врачом;
• делать УЗИ с использованием вагинального датчика;
• проходить кольпоскопию.
• до посещения гинеколога или лаборатории, за 3 часа, не следует мочиться.

Сдавать мазки нужно вне менструального кровотечения. Даже если есть просто «мазня» в последний день месячных, лучше отложить исследование, так как результат наверняка будет плохим - выявится большое количество лейкоцитов.

Относительно приема алкоголя запретов нет.

Можно ли сдавать мазок при приеме антибиотиков или сразу после лечения? Нежелательно это делать в течение 10 дней после использования местного действия препаратов (вагинальных) и одного месяца по прошествии приема антибактериальных средств внутрь.

Микроскопическое исследование назначают:

• в плановом порядке при посещении гинеколога;
• при поступлении в гинекологический стационар;
• перед ЭКО;
• во время беременности (особенно, если часто бывает плохим мазок);
• если есть жалобы: необычные выделения, зуд, тазовая боль и т. д.

Расшифровка результатов: что считать нормой, а что - патологией в микрофлоре

Для начала предлагаем вашему вниманию таблицу, в которой отображены показатели так называемой первой степени чистоты. В ней нет упоминаний уретры (хотя материал забирается и оттуда), так как мы говорим о гинекологических заболеваниях. Воспалительный же процесс в мочеиспускательном канале лечит уролог.

Показатель	Влагалище	Цервикальный канал
Лейкоциты	0-10 в поле зрения	0-30 в поле зрения
Эпителий	в зависимости от фазы мен. цикла
Слизь	умеренно
Трихомонады	нет
Гонококки	нет
Ключевые клетки	нет
Кандиды	нет
Микрофлора	грамположительные палочки	отсутствует

Эпителий - количество эпителиальных клеток не считают, так как это не имеет диагностической ценности. Но слишком скудное количество эпителия говорит об атрофическом типе мазка - бывает у женщин в период менопаузы.

Лейкоциты - считаются в «поле зрения»:

• не более 10 - небольшое количество;
• 10-15 - умеренное количество;
• 30-50 - большое количество, женщина замечает патологические симптомы, а врач при осмотре диагностирует воспалительный процесс во влагалище и (или) на шейке матки.

Слизь (тяжи слизи) - в норме должна присутствовать, но большое ее количество бывает при воспалении. В уретре слизи быть не должно.

Палочковая флора или гр лактоморфотипы - норма, это защита влагалища от микробов.

Трихомонад, гонококков и ключевых клеток у здоровой женщины в шейке матки и во влагалище быть не должно. Кандиды в норме также отсутствуют. По крайней мере, в значимом количестве, которое выявляется при анализе на флору.

Годность мазка не большая. Но если женщина поступает в стационар, то у нее прямо там, при первичном осмотре на кресле, берут свежий.

Обычно результаты действительны 7-14 дней. Поэтому, если вам нужно его сдать перед операцией, сделайте это дня за 3 до поступления в больницу. Последним из назначенных анализов.

Что обнаруживают в бакпосеве

Расшифровать результат культурального исследования лучше всего сможет гинеколог. Но и вы сами, если прочтете информацию ниже, ориентировочно разберетесь в своем анализе.

Количество микроорганизмов может выражаться «крестами»:

• «+» – небольшое количество;
• «++» – умеренное количество;
• «+++» – большое количество;
• «++++» – обильная флора.

Но чаще количество представителей микрофлоры выражают в степенях. Например: клебсиелла : 10 в 4 степени. Кстати, это один из представителей энтеробактерий. Грамоотрицательная палочка, аэробный микроорганизм. Один из наиболее опасных возбудителей, хоть и является лишь условно-патогенным. Все потому, что клебсиелла резистентна (невосприимчива) к большинству антибактериальных средств.

Ниже мы опишем другие частые термины, которые встречаются в результатах исследования, или вы можете услышать от врача.

Soor - это кандидоз или по-другому - молочница. Лечится антимикотическими (противогрибковыми) препаратами.

Бластоспоры и псевдомицелий дрожжеподобных грибов - кандидоз или другое грибковое заболевание, обычно лечится аналогично молочнице.

Дифтероиды - условно-патогенные микроорганизмы, по результатам исследований ученых, у большинства женщин порядка 10% микрофлоры составляют именно они, а также стрептококки, стафилококки, кишечная палочка, гарднерелла. Если нарушена флора, их число увеличивается.

Смешанная флора - вариант нормы, если нет симптомов болезни, сплошь лейкоцитов или сильного их увеличения (40-60-100). 15-20 - вариант нормы, особенно во время беременности.

Энтерококки (Enterococcus) - представители кишечной микрофлоры, которые иногда попадают и во влагалище. Грамположительные кокки. Про энтерококк фекалис (Enterococcus faecalis) мы . Есть еще enterococcus coli - кишечная палочка. Обычно вызывают неприятную симптоматику при концентрации выше 10 в 4 степени.

Синегнойная палочка - грамотрицательная бактерия. Часто поражает людей с низким иммунитетом. Имеет хорошую устойчивость к антибиотикам, что затрудняет процесс лечения.

Полиморфная палочка - обычный представитель биоценоза влагалища. Если количество лейкоцитов в норме и жалоб нет, ее наличие не должно тревожить.

Эритроциты - могут быть в маленьком количестве в мазке, особенно, если его брали во время воспалительного процесса или когда были небольшие кровянистые выделения.

Кокковая или коккобацилярная флора - обычно бывает при инфекционном процессе во влагалище или на шейке матки. Если у женщины есть жалобы, требуется антибактериальное лечение - санация влагалища.

Диплококки - разновидность бактерий (кокков). В небольшом количестве не приносят вреда. За исключением гонококков - возбудителей гонореи. Ее лечат всегда.

А в заключение приведем частые сокращения, которые пишут на бланках результатов анализов:

• L – лейкоциты;
• Эп – эпителий;
• Пл. эп. — плоский эпителий;
• Gn (гн) –гонококк, возбудитель гонореи;
• Trich – трихомонада, возбудитель трихомониаза.